Southern

技术简介________________________________________Southernblotting是对基因组DNA特定序列进行检测的常用方法，首先提取基因组并利用限制性内切酶消化DNA，在琼脂糖凝胶进行电泳分离，将DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。技术原理：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。服务内容________________________________________本公司提供的Southernblot服务步骤如下：1．探针的制备PCR获取检测探针，标记地高辛。2．核酸样品的制备动植物组织或细胞抽提出基因组DNA，并使用限制性内切酶将其切断成不同大小的片段。3．琼脂糖凝胶电泳分离酶切DNA样品电泳是将DNA样品按片断长短进行分离，然后进行杂交，这样可确定杂交靶分子的大小。4．转膜与固定将凝胶中变性的单链DNA通过虹吸法转移到相应的固相载体上，使用高温烘烤的方法使DNA片段固定于膜上。5．杂交与显影转印后的滤膜经过预杂交一段时间后，加入标记的探针DNA进行杂交反应。杂交完成后使用酶底物对与标记探针结合的酶联抗体进行显色，烘干拍照。您需要提供以下材料：实验样品：用于抽提核酸和探针制备的材料：动植物组织；探针序列信息；实验数据和参考文献：这将会帮助我们更好地理解您的实验背景，有利于实验的顺利进行。您将获得以下结果：实验结果：酶切检测跑胶图片，southern杂交后的结果图片；实验产物：探针引物及扩增产物、杂交膜。

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