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蛋白层析柱

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1、简介:上海宸乔生物科技有限公司蛋白质是生命活动的物质基础,也是生物体内的功能性大分子。随着分子生物学、结构生物学、生物制药行业等研究的不断深入,蛋白质纯化成为近年来越来越热的研究话题。蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混合物的形式存在,不同类型的细胞中含有不同结构和功能的蛋白质,这就使得蛋白质纯化成为一项精细而复杂的任务。因此,高效的蛋白纯化技术和手段是蛋白质研究的基础和关键之一。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段两个阶段。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如RNA、DNA等分开,常用的方法为硫酸铵沉淀法。精细纯化阶段的目的是把目的蛋白与其他大小及理化性质接近的蛋白区分开来,常用的方法有:凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析、亲和层析等。其中,凝胶过滤层析是最为常见的纯化手段之一。凝胶过滤(也称分子筛层析、排阻层析)是一种根据分子大小从混合物中分离蛋白质的方法。不同蛋白的形状及分子大小存在差异,在混合物通过含有填充颗粒的凝胶过滤层析柱时,由于各种蛋白的分子大小不同,扩散进入特定大小孔径颗粒内的能力也各异,大的蛋白分子会被先洗脱出来,分子越小,越晚洗脱,从而达到分离蛋白的目的。

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