对于大多数纯化步骤来说,建议从开始的阶段使用强离子交换柱,可在摸索方法的过程中有一个宽的pH 范围
二、纯化后的蛋白收率较低怎么办?
调整样品 pH,使样品 pH与起始缓冲液 pH保持一致;
改变洗脱模式,如将线性梯度模式改变为阶段性梯度洗脱;
改变洗脱方法,提供核酸分离纯化柱生产厂家,专业报价,提供核酸分离纯化柱生产厂家,哪里有报价,如将pH 洗脱方法改为盐梯度洗脱方法;
改变洗脱强度洗脱过程中始终保持一定的操作压,流速不可过高,保持在 0.5~3.0mL/min即可
三、样品过于粘稠怎么处理?
样品过于粘稠可能是由于含有的蛋白太多,或者含有大分子量的核酸分子,通常有以下解决方法:
增加裂解前稀释细胞所用体积;
增加裂解时间,提供核酸分离纯化柱生产厂家,正规报价,直至黏度下降,或者增加 DNase 和Mg2+的剂量;
增加机械裂解细胞的效率;
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降低上样流速比如,如果是要将目的蛋白和小分子物质分开,上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,可以根据他们分配系数的差异,选用Sephadex
G-25和 G-50;对于小肽和低分子量物质的脱盐,则可以选用Sephadex G-10、G-15以及 Bio-GelP-2 或 P-4;
如果是分子量相近的蛋白质,一般选用排阻限度略大于样品中最高分子量物质的凝胶
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